1试管苗保存

  从田间种植的种质资源选择具有典型品种特性的健康植株(从形成壮苗到盛花期均可以取)，取1.5～2.0cm有腋芽的茎段7～10个，用清水冲洗1～2h，然后置于超净工作台上，用1‰的升汞水溶液浸泡8～10min，若茎段较粗则增加至12min左右。用灭菌的镊子将茎段分次取出，每次取出1～2个，在灭菌水中彻底清洗3～4次，放入普通的MS培养基中进行培养(特别注意每次从升汞中取茎段要用无菌的镊子)。分次取出茎段可以使茎段在升汞中的处理时间有一个梯度，保证至少有1个已经成为无菌苗。由于种质资源数量比较多，这样做就会大大降低工作量，提高工作效率。将处理好的茎段放在组培苗生长间，补充光照。保持生长间的温度在20～25℃。无菌苗形成过程中，天天进行检查，发现污染苗后挑出并进行高压灭菌，以防备造成试管苗生长间的整体污染。无菌苗形成后，在无菌条件下，将无菌苗继续在普通MS培养基上扩繁1次，每1～2个茎段放入含3%的甘露醇MS培养基的试管中进行保存，一般每1个资源至少要保存3管，这样取用非常方便。控制种质资源保存库的温度在15～20℃，每周对资源库进熏蒸消毒1次，防止试管苗二次污染。在这种条件下，每1代试管苗可以保存120～150d，在此期间，要定期检查试管苗的情况。由于受到了甘露醇及继代过多或是环境因素的影响，有些资源早期就会玻璃化，一旦发生这种情况，应立即将玻璃化的试管苗转移到普通的MS培养基上，20～30d就可以形成新的试管苗继续保存。

  2田间种植保存

  以试管苗保存约2年，试管苗会表现出明显的退化，例如整体的玻璃化，生长缓，甚至在继代后不能形成新的试管苗，这就需要进行1次田间种植以重新获得试管苗保存。在当地马铃薯播种时间的前1个月，将已退化的试管苗种质资源转入普通培养基中，扩繁1代15～20株形成比较壮的组培苗，定植在育苗钵，置于温室或网棚中，每份资源至少扩繁15株以上，温室或网棚中的管理与微型薯温室生产相同。待植株根系较发达长出7～10片叶时，将其移入室外进行炼苗5～10d，然后带土移入大田。这种移栽苗因长势较弱，所以要求大田土壤疏松，灌溉条件好，肥料充足，并要严防人畜破坏。大田移栽时，每个资源选到10株壮苗移入大田，每个资源种植1行，株行距为30cm×65cm，剩余的不要丢弃，可以作补苗用。田间管理要做到早除草、早培土、早防病，加肥料的充足供给，花期前可追施1次壮苗肥，壮苗肥为尿素，施用量控制在75～105kg/hm2。并可以以30倍磷酸二氢钾水溶液作为叶面肥进行喷施，定期进行病虫害防治。植株健壮后，以具有典型品种特性的健康植株作为试管苗的来源。在马铃薯种质资源的保存过程中，田间种植与试管苗保存是相互结合、密不可分的，是一个循环往复的过程。由于种质资源少则几百份，多则几千份，所以种质资源可以多点保存，也可以分期分批保存，每年种植一部分，试管保存一部分，来年可以反过来，这样可以经济合理地搭配人力和物力。

  论文摘要：马铃薯种质资源非常丰富，要科学合理的利用马铃薯种质资源，保存是一个关键性环节。就马铃薯种质资源的2种保存方法，即试管苗保存方法和田间种植保存方法进行了探讨，旨在为马铃薯种质资源保存工作提供参考。

  参考文献

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